国际期刊广泛引用的【肠杆菌科鉴定试剂盒】

中文品名：Hi25™肠杆菌科鉴定试剂盒

英文品名：Hi25™ Enterobacteriaceae Identification Kit

货号：KB003

规格：5T/盒、10T/盒、20T/盒

厂家:   HiMedia公司

用途：鉴定肠杆菌科成员（鉴定到种）

Hi25肠杆菌科鉴定试剂盒具有CE认证和FDA注册，并被国际期刊广泛引用，可精准鉴定肠杆菌科成员到种的水平，适合科研及食品、乳制品及制药工业微生物鉴定使用。

概况：

KB003是一款全面的革兰氏阴性肠杆菌科鉴定试剂盒。它在生化鉴定卡上每个孔内都预置了迷你培养基和生化试剂，包含24项生化检查（含13种传统生化试验和11种糖发酵试验）。孔内接种的菌液生长代谢后，导致培养基颜色变化。该试剂盒还提供氧化酶反应试纸，用于氧化酶的检查。

图. HiMedia生产的菌种生化鉴定卡示意图

第1张鉴定卡

第2张鉴定卡

使用说明：

1）纯菌培养

待鉴定菌种应先进行分离和纯化。可在营养琼脂（货号M001/货号M1274）或鉴别培养基如麦康凯琼脂（货号M082）上挑取一个菌落，接种在５ml脑心浸膏肉汤中，35-37℃培养4-6小时，直到在620nm处，接种液浊度≥0.1OD或0.5 McFarland标准。一些苛养菌可能需要6小时以上的孵育时间，以保证接种液浊度≥0.1OD

2）氧化酶实验

采用试剂盒提供的氧化酶纸片（货号DD018）进行氧化酶检查。挑取一个菌落，接触和摩擦氧化酶纸片。10秒内出现深紫色为阳性反应。10秒-60秒出现颜色变化表明为延迟的阳性反应。60秒后出现颜色变化或无变化为阴性反应。氧化酶试验必须完成，它是整个鉴定体系的一部分。

3）接种菌液并培养

无菌环境下打开试剂盒，撕掉封条。在生化鉴定卡上每孔接种50μl上述菌液。也可用接种环划线。35℃-37℃孵育18-24小时。

4）添加辅助试剂

以下试验在18-24小时孵育期结束后，添加如下辅助试剂（试剂盒提供辅助试剂）。

a.苯丙氨酸脱氨试验：第5个孔

加2-3滴TDA试剂（货号R036）。1分钟内出现深绿色为阳性。无颜色变化为阴性。

b.硝酸盐还原试验：第6个孔

加1-2滴对氨基苯磺酸（货号R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（货号R009）立即出现粉红色为阳性，颜色无变化为阴性。

c.伏-普试验：第9个孔

加2-3滴Barritt试剂A(货号R029)和1滴Barritt试剂B（货号R030）5-10分钟内出现粉红色为阳性，无颜色变化或为浅铜色为阴性。

d.甲基红试验：第10个孔

加1-2滴甲基红试剂（货号I007）

试剂保持红色为阳性

试剂脱色变黄为阴性

e.吲哚试验：第11个孔

加1-2滴Kovac试剂（货号R008）。10秒内出现粉红色为阳性。试剂保持浅白色为阴性。

5）读取结果

显色结果与《结果诠释表》比对，确定是否存在阳性反应。再根据《菌种标准表》完成鉴定。

可鉴定的肠杆菌科菌种：

水生布戴约维采菌（Budvicia aquatica）

乡间布丘氏菌（Buttiauxella agrestis）

戴氏西地西菌（Cedecea davisae）

拉氏西地西菌（Cedecea lapagei）

奈氏西地西菌（Cedecea neteri）

无丙二酸柠檬酸杆菌（Citrobacter amalonaticus）

差异柠檬酸杆菌（Citrobacter diversus）

弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）

产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）

河生肠杆菌生物1群（Enterobacter amnigenus (Biogroup I)

河生肠杆菌生物2群（Enterobacter amnigenus (Biogroup II)

泰勒肠杆菌或生癌肠杆菌Enterobacter taylorae (E. cancerogenus)

阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）

日沟维肠杆菌（Enterobacter gergoviae）

阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）

大肠埃希氏菌（Escherichia coli）

非活泼型大肠埃希氏菌Escherichia coli, inactive）

螳螂埃希氏菌（Escherichia blattae）

弗格森埃希氏菌（Escherichia fergusonii）

赫尔曼埃希氏菌（Escherichia hermanii）

伤口埃希菌（Escherichia vulneris）

美洲爱文菌（Ewingella americana）

蜂房哈夫尼菌（Hafnia alvei）

产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）

肺炎克雷伯菌臭鼻亚种Klebsiella pneumoniae subspecies ozaenae

肺炎克雷伯菌肺炎亚种（Klebsiella pneumoniae subspecies pneumoniae）

肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种（Klebsiella pneumoniae subspecies rhinoscleromatis）

土生克雷伯氏菌（Klebsiella terrigena）

抗坏血酸克吕沃菌（Kluyvera ascorbata）

非脱羧勒克氏菌（Leclercia adecarboxylata (Escherichia adecarboxylata) ）

摩氏摩根菌摩氏亚种（Morganella morganii subspecies morganii）

摩氏摩根菌塞氏亚种（Morganella morganii subspecies sibonii）

成团泛菌（Pantoea agglomerans）

分散泛菌（Pantoea dispersa）

奇异变形杆菌（Proteus mirabilis）

产粘变形杆菌（Proteus myxofaciens）

潘尼变形杆菌（Proteus penneri）

普通变形杆菌（Proteus vulgaris）

产碱普罗维登斯菌（Providencia alcalifaciens）

雷极普罗维登斯菌（Providencia rettgeri）

拉氏普罗维登斯菌（Providencia rustigianii）

水生拉恩菌（Rahnella aquatilis）

邦戈尔沙门氏菌（Salmonella bongori）

猪霍乱沙门氏菌亚利桑那亚种（Salmonella choleraesuis subspecies arizonae）猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种（Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis）

猪霍乱沙门氏菌双相亚利桑那亚种（Salmonella choleraesuis subspecies diarizonae）

猪霍乱沙门氏菌豪顿亚种（Salmonella choleraesuis subspecies houtenae）

猪霍乱沙门氏菌印度亚种（Salmonella choleraesuis subspecies indica）

猪霍乱沙门氏菌萨拉姆亚种（Salmonella choleraesuis subspecies salamae）

肠炎沙门氏菌（Salmonella enteritidis）

伤寒沙门氏菌（Salmonella typhi）

鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium

虫媒沙雷菌（Serratia entomophila）

无花果沙雷菌（Serratia ficaria）

居泉沙雷菌（Serratia fonticola）

粘质沙雷菌（Serratia marcescens）

气味沙雷菌1型（Serratia odorifera 1）

气味沙雷菌2型（Serratia odorifera 2）

普城沙雷菌（Serratia plymuthica）

变形斑沙雷菌（Serratia proteamaculans）

深红沙雷菌（Serratia rubidaea）

鲍氏志贺氏菌、福氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌（Shigella boydii, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae）

宋内氏志贺菌（Shigella sonnei）

小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica）

费氏耶尔森菌（Yersinia frederiksenii）

中间耶尔森菌（Yersinia intermedia）

鼠疫耶尔森菌（Yersinia pestis）

假结核耶尔森氏菌（Yersinia pseudotuberculosis）