支原体标准品灵敏度跟储存有关吗?

2024-04-28
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在支原体标准品的处理和保存过程中,冻干粉是一种新型的形式。通过冻干技术将溶液中的水分去除,以实现标准品长期储存的稳定性、运输的便利性等。

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然而,有不少实验人员,经常会随手将试剂丢尽-20℃冰箱中,认为这样可以更好地保存试剂。事实上,对于冻干粉而言,2-8℃已经是非常适合冻干粉储存的温度了,在该温度下,冻干粉试剂可以稳定地长期储存(以德国MB公司的支原体检测标准品系列为例)。那么,为什么我们习惯性认为的冷冻低温保存,遇到冻干粉就不灵了呢,甚至适得其反?本期内容为各位答疑解惑。


水分重新进入冻干粉的问题主要涉及到物质的热力学性质和环境条件的变化。

冻干粉是通过冻干技术将溶液中的水分去除得到的干燥粉末,这有助于保持支原体标准品的稳定性和长期保存性。但由于冻干粉本身并非一点水分都没有,而是含有十分微量的残留水分。如果将冻干粉再次暴露于冷冻温度,环境中的水蒸气会以气态形式存在,吸附在粉末之间,导致冻干粉的含水量增加,使得后续配制溶液所得到的浓度出现偏差,从而影响实验结果。


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另外,随着环境条件的变化,比如温度的升高或相对湿度的增加,环境中的水蒸气会向粉末中迅速扩散,并重新溶解到粉末内部。这个过程导致冻干粉迅速吸湿,使得原本干燥的粉末逐渐变软,并最终重新溶解成液体。水分的重新溶解可能会导致支原体标准品的水分含量、结构变化或损坏,从而影响其活性和可靠性。

因此,为了确保支原体标准品的质量和稳定性,建议按照说明进行储存,这样可以有效地防止水分重新进入粉末中,保持支原体标准品的长期稳定性和可靠性。


10 CFU™ 支原体检测限标准品

10 CFU™ Mycoplasma Sensitivity Standards

欧洲药典和日本药典要求,如果用NAT法(核酸扩增检测的英文简称,包括PCR/qPCR)替代培养法检测支原体时,NAT法检测的灵敏度需达到10CFU/ml。

德国MB公司提供系列的支原体灵敏度标准品(灭活支原体),涵盖了欧洲药典和日本药典规定的所有支原体物种(见下表),用于支原体核酸扩增法(PCR/qPCR)的方法学验证(检测限和耐用性验证)。


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注意:10CFU™支原体标准品使用前在2-8℃保存,性能稳定。支原体复溶后要立即进行DNA抽提,不要再保存,因为担心可能降解。

(2)产品特点

(1)来自英国菌种保藏中心NCTC,是灭活支原体

(2)传代次数少,支原体无变异

(3)产品为冻干粉,保证其稳定性

(4)分析证书(COA)提供该批次GU:CFU比值(基因组单位/菌落形成单位比值)

(5)支原体已灭活,保障细胞实验室安全

(3)操作说明

标准品在复溶前,在室温放置平衡。

(1)标准品短时离心,以收集冻干粉至管底。

(2)每管中加入1ml样品基质液(需保证无支原体污染)。

(3)室温静置5分钟。

(4)涡旋混合10秒钟,再离心10秒钟。

(5)复溶后的标准品即可用于DNA抽提。推荐使用MB的支原体DNA提取试剂盒 (英文名:Venor®GeM Sample Preparation Kit)(每管核酸纯化柱加200μl复溶标准品)。