如何快速鉴别细胞污染类型

细胞污染通常指的是细胞培养中的生物污染，主要类型包括细菌污染、真菌污染、支原体污染、黑胶虫污染和病毒污染等。以下是一些快速鉴别细胞污染类型的方法：

观察培养液的变化：

细菌污染：培养液一般会浑浊变黄，稍微振荡后可见培养基表面有漂浮物。

真菌污染：培养液通常保持清亮，不变色，但可见淡黄色或白色漂浮在培养基表面的点状菌落。

支原体污染：培养液一般会浑浊，但细胞病变不很明显，只是慢慢死去。

黑胶虫污染：在低倍镜下观察时可见黑色小点，高倍镜下可看见黑色的小虫游来游去。

显微镜观察：

细菌污染：在高倍镜下可见杆状或球状的细菌在培养基中游动。

真菌污染：镜下可见丝状物，有些像珊瑚状，慢慢会长出很细的黑色丝状物。

支原体污染：在镜下呈黑色微小颗粒，多位于细胞与细胞之间。

荧光染色法观察：

支原体污染：用荧光染料与DNA特异地结合，可使支原体内的DNA着色，荧光显微镜下支原体成绿色小点，散于细胞周围或附于细胞表面。

其他检测方法：

电镜检测：条件许可时，可用扫描电镜或投射电镜观察支原体污染。

培养检测：对于支原体污染，可以将细胞悬液加入支原体肉汤培养基，观察肉汤培养基有无雾状沉淀，然后进行分离培养观察有无特定菌落出现。

PCR和ELISA等分子生物学方法：可以检测病毒、细菌和真菌等微生物的核酸和蛋白质等分子特征，从而可以快速准确地检测到污染物。

细胞生长和形态观察：

注意观察细胞生长状态和形态的变化，如生长缓慢、细胞变圆脱落等，可能是污染的表现。