支原体污染的细胞培养物能用于实验吗

支原体污染的细胞培养物不能用于实验。以下是详细的解释和归纳：

支原体污染对细胞的影响：

支原体污染会导致细胞生长缓慢、形态改变，甚至引起细胞死亡。

支原体可以大量消耗培养基中的营养和细胞代谢的基础成分，如核酸前体、氨基酸、维生素、脂质、胆固醇等，导致细胞增殖缓慢及各种代谢、功能紊乱甚至丧失。

支原体还会吸附在细胞表面，破坏细胞膜的完整性，更有少数类型支原体可进入细胞内，如发酵支原体、生殖支原体和肺炎支原体。

对实验结果的影响：

被支原体污染的细胞无法用于得出准确的实验数据。

支原体污染会干扰细胞的代谢过程，影响细胞的功能和表达，从而干扰实验结果的分析和解读。

支原体还可能作为外源性因素，对实验结果产生潜在的干扰，使研究者难以区分细胞的内在变化与外界因素的影响。

检测支原体污染：

支原体污染在普通光学显微镜下难以被发现，细胞被污染早期不会表现出明显的“症状”。

目前常用的检测方法有：DNA染色法、支原体培养法、PCR法（包括凝胶电泳和荧光定量）、化学发光法等。但需要注意的是，这些方法虽然可靠，但实验周期可能较长。

综上所述，支原体污染的细胞培养物不能用于实验，因为支原体污染会严重影响细胞的生长、代谢和功能，进而干扰实验结果的准确性和可靠性。因此，在细胞培养过程中，需要采取一系列预防措施来避免支原体污染，如加强实验室的清洁和消毒工作、选择质量可靠的培养基和血清等培养材料、实验操作人员严格遵守实验室规范等。如果怀疑细胞培养物被支原体污染，应立即进行检测并采取相应的处理措施。

对于费力扩增的细胞（如已转染，或经过体外刺激），如果细胞中发现有支原体污染，但此细胞又不愿丢弃，希望继续培养，推荐使用MB公司生产的复合抗生素Zell Shield®。

细胞祛除支原体试剂Zell Shield使用方法：

（1）在每次使用Zell Shield®之前，细胞传代时，先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法”处理好细胞，再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞，能达到更好的祛除支原体的效果（“悬浮冲洗法”的详细步骤，见下文）。

（2）Zell Shield®常规为-18℃保存，建议使用前，先融化分装，仍旧-18℃避光保存，使用时按需融化配制。避免反复冻融。

（3）Zell Shield®按1:100浓度可直接加入培养基。例如：500ml培养基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培养基使用。

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