FBS胎牛血清溶解(融化)三步法操作步骤详解

刚进入实验室的同学对于FBS胎牛血清解冻方法比较模糊，今天缔一生物小编就为大家分享国际上推荐的三步法融化解冻，可尽可能减少沉淀出现，保留血清中因子的活性。

**步：室温或较低温水浴初步融化

温度：室温或15-20℃（新接的自来水温度约24℃上下）

时间：

100ml血清：35分钟（室温）或5分钟（15-20℃水浴）

500ml血清：90分钟（室温）或18分钟（15-20℃水浴）

1000ml血清：100分钟（室温）或20分钟（15-20℃水浴）

注意：此步骤的目的是使血清初步融化，降低冰块大小，为后续步骤做准备。

第二步：中温水浴进一步融化

温度：20℃水浴（新接的自来水温度约24℃上下）

时间：

100ml血清：15分钟

500ml血清：25分钟

注意：在融化过程中，轻轻摇动瓶身使血清混匀，但不要产生泡沫。

第三步：高温水浴完全融化

温度：37℃水浴

时间：

100ml血清：20分钟

500ml血清：35分钟

需要注意的是，如果血清是储存在-80℃的，需要提前几天先转移至-20℃冰箱中（至少24小时），再使用三步法溶解，以避免温差过大使血清失活。

在整个融化过程中，血清的平面要完全浸在水中。

FBS胎牛血清溶解(融化)三步法可大限度保留血清中因子的活性，减少冻融次数，血清应遵循现用现配，现配现解冻的原则。彻底解冻的血清，应根据实验需求，将其分装，保证每一份够一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。分装好的血清，密封好后，立即放回-20℃冰箱继续冷冻储存。需要配制培养基的时候，再从-20℃冰箱中取出一管来尽快解冻使用（**能全部配成培养基，不要有剩余），配好的培养基在4℃冰箱储存**不超过一周。