细胞支原体污染了怎么办

细胞支原体污染是一个常见的问题，特别是在细胞培养过程中。支原体污染可能会对细胞的生长、代谢以及实验结果产生显著影响。以下是一些处理细胞支原体污染的方法：

一、立即停止使用污染的细胞

一旦确认细胞被支原体污染，应立即停止使用该批次的细胞，并避免其进一步扩散。

二、对污染源进行全面消毒和清洁

对培养环境、试剂和操作过程进行全面消毒和清洁，以消除潜在的污染源。

三、选用适当的处理方法

根据细胞的珍贵程度和实验需求，可以选择不同的处理方法：

丢弃污染细胞

对于非重要的细胞，如培养中的细胞、WCB的细胞等，将培养物与用过的培养基灭活后丢弃即可。

使用支原体杀除剂

对于珍贵的、样品不可再得的细胞，或价格昂贵的种子细胞，可以选用特异性的支原体杀除剂进行清除。例如，使用Mynox®（由Minerva公司生产）等生物制剂，这些试剂可在短时间内（如2-3小时）特异性地杀除支原体，且对细胞无毒性。但需注意，使用这些试剂后可能需要更换新的培养耗材和培养液，并重新培养细胞。

药物辅助加温处理

先用药物处理污染的组织培养物，然后将培养物放在41℃培养18小时，以杀死支原体。但这种方法可能对细胞有不良影响，需要谨慎使用。

使用支原体特异性血清

用5%的兔支原体免疫血清可去除支原体污染。特异抗体可抑制支原体生长，经抗血清处理后一段时间（如11天）即可转为阴性。

巨噬细胞吞噬法

从动物腹腔采取巨噬细胞，纯化后加入被支原体污染的细胞培养液中混合培养。巨噬细胞能够吞噬并清除支原体。

反复离心洗涤

通过细胞营养驯化、优质细胞群的筛选、细胞清洗和反复离心洗涤等方法，利用离心力、细胞、微生物质量和悬液的浮力差达到清除支原体的目的。这种方法可能需要结合敏感抗生素的抑杀作用以提高效果。

更换培养基和耗材

更换新的、经过验证的无支原体污染的试剂和培养基，并重新开始细胞培养。

四、预防未来污染

在实验室工作中，应严格遵守无菌操作规范，确保实验环境的清洁和卫生。

定期对实验设备进行维护和消毒，避免交叉污染。

对于细胞培养等关键实验环节，建议进行定期的质量控制和监测，以确保实验结果的准确性和可靠性。

五、注意事项

在处理支原体污染时，应仔细阅读并遵循相关试剂和设备的操作说明。

对于不确定的处理方法，应咨询实验室管理人员或相关领域的专家。

支原体污染可能对实验结果产生显著影响，因此在实验前应进行支原体检测以确认细胞的无污染状态。