实验室细胞培养支原体污染怎么办？

支原体污染是实验室细胞培养中常见的问题，它能引起细胞生理和代谢变化，影响实验结果的准确性和重复性。因此，及时识别和处理支原体污染至关重要。

判断标准

1.pH值变化：支原体污染可能会导致培养基pH值异常。

2.细胞形态变化：污染后的细胞可能形态异常，生长速度减慢。

3.细胞黏附性变化：某些类型的细胞可能会失去黏附性。

4.细胞死亡率增加：细胞的存活率下降，死亡率提高。

检测方法

1.直接培养：将样本接种到支原体专用培养基中，观察是否有生长。

2.荧光染色：使用荧光标记的DNA探针特异性结合支原体的DNA或RNA，通过荧光显微镜检查。

3.PCR检测：使用特异性引物检测支原体的DNA，这是一种快速、敏感的检测方法。

4.ELISA检测：通过检测细胞培养上清液中支原体特异性抗原来识别污染。

处理方法

1.废弃严重污染的细胞：如果细胞严重污染，最安全的方法是废弃这些细胞，彻底清洗并消毒使用过的器皿和设备。

2.使用抗生素或者专业的细胞支原体祛除试剂治疗：

推荐使用MB公司生产的复合抗生素Zell Shield®。Zell Shield^®通过阻止支原体、真菌、霉菌、致命病菌增殖过程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。   
3.彻底清洁和消毒：对实验室表面、设备以及操作环境进行彻底的清洁和消毒。

4.防止交叉污染：确保使用无菌操作技术，包括使用无菌工具和消毒设备，以防止污染扩散。

5.定期检测：即使没有明显的污染迹象，也应定期对细胞培养进行支原体检测，以确保培养环境的清洁。