新生牛血清是否需要灭活,主要取决于血清的用途和品质。
一、一般情况
在大多数情况下,新生牛血清在使用前需要进行灭活处理。这一步骤的主要目的是去除血清中的补体成分,避免补体对细胞产生毒性作用。灭活处理通常是将血清加热至56℃并保持30分钟。然而,这个过程也可能导致血清中一些对细胞有利的成分(如生长因子)的损失。
二、特殊情况
高品质血清:对于一些品质高的胎牛血清和新牛血清,如果确认其中不含补体成分,可以考虑不经灭活直接用于细胞培养。这是因为胎牛血清没有完整的补体系统,所以通常无需特意进行热灭活。
特殊用途:在某些特殊情况下,如需要保持血清中某些活性成分的稳定性和活性时,也可能不进行灭活处理。
三、灭活方法
如果需要进行灭活处理,可以采用以下步骤:
将-20℃保存的新生牛血清置于4℃冰箱中过夜,待其缓慢解冻完全融化。
将融化的血清置于56℃水浴中,同时设置一装相同体积及相同温度水的对照瓶,对照瓶中放置温度计。
待温度计升到56℃时,开始计时,灭活30分钟。
灭活的血清进行无菌分装,并储存于-10℃至-20℃的环境中,避免反复冻融。
四、注意事项
血清从冰冻区取出后,应置于2℃~8℃的环境中融化,避免直接由-20℃进入高温环境,以防蛋白质凝集而出现沉淀。
融化过程中应间歇地轻轻摇晃均匀,待全部溶解后再进行分装或直接使用。
灭活后的血清应妥善保存,以保持其品质。
综上所述,新生牛血清是否需要灭活取决于血清的用途和品质。在大多数情况下,为了确保血清的安全性和稳定性,建议在使用前进行灭活处理。然而,对于某些高品质的血清或特殊用途,也可以考虑不进行灭活处理。