祛除实验室中恒温水环境中的支原体污染，提高实验结果稳定性

在细胞实验过程中，需要用到装有恒温水的仪器，对样品进行处理或给细胞培养提供支持，例如水浴锅、培养箱水槽等设备。作为维持细胞生长与实验条件稳定的关键设施，其清洁与无菌状态直接关系到实验结果的准确性和可靠性。

实验室中常见的恒温水浴环境有哪些？

细胞实验室中的恒温水浴环境主要包括水浴锅、培养箱中水槽以及用于某些实验步骤的恒温平台等。这些设备通过精确控制温度，为细胞培养、等提供了稳定的实验条件。然而，这些稳定的环境也为微生物的生长提供了便利条件。

为什么恒温水浴环境容易发生支原体污染？

温度适宜：支原体是一类对温度敏感的微生物，恒温水浴提供的稳定温度恰好符合其生长需求，使得支原体得以迅速增殖。

湿度较高：恒温水浴环境通常保持一定的湿度，有利于微生物的生存和繁殖。

营养源丰富：一旦细胞实验室中清洁工作稍有松懈，细胞培养过程中使用的培养基、血清等富含营养物质的试剂，混入到恒温水浴环境中，很容易成为支原体的食物来源。

操作频繁：实验人员频繁地打开和关闭水浴箱盖，以及使用未彻底消毒的器材，都会增加支原体污染的风险。

为什么要预防支原体污染？

细胞形态改变：支原体感染会导致细胞形态发生不规则变化，如细胞大小改变、细胞膜破坏等，影响细胞的正常生理功能。

生长受抑制：支原体污染会干扰细胞的正常生长和增殖过程，导致细胞数量减少或生长速率减缓。

基因表达和蛋白质合成异常：支原体感染可能引起细胞内基因表达的异常，影响蛋白质合成和细胞信号传导途径，进而影响细胞的生物学功能。

细胞凋亡增加：部分支原体感染会诱导细胞凋亡（程序性细胞死亡），导致细胞数量减少和形态学变化。

影响实验结果： 由于支原体感染引起的细胞变化，实验结果可能会受到严重干扰，导致数据不准确、可重复性差。这对于依赖细胞生物学特性、信号传导途径或药物反应等研究的实验结果尤为重要。错误的实验结果不仅会影响科学研究的进展，还可能误导临床应用和药物开发。

如何预防恒温水浴环境发生支原体污染？

一、加强实验室环境管理

保持实验室的清洁度和无菌状态，定期清洁和消毒恒温水浴设备及其周围环境。每天为水浴锅、培养箱水槽更换无菌水，能减少一部分污染的发生，但在实际操作过程中这样的处理无疑是耗时又耗力的，为了解决这一问题，往往需要在细胞培养相关的恒温水中加入抑菌试剂。这类试剂的选择也十分有讲究。我们日常生活中的常见的抑菌溶液有这几种：次氯酸、硫酸铜、新洁尔灭、次氯酸钠，但以上几种溶液都有难以规避的缺点。次氯酸容易分解，与病菌作用后就会降解，无法持续作用，且无法对失效的消毒液做出指示；硫酸铜和新洁尔灭容易腐蚀水盘；次氯酸钠溶液易挥发出次氯酸，对细胞造成伤害。我们选择消毒液的关键点，就是成分安全稳定、不会损害仪器、不易挥发影响细胞。市场上主流的水环境支原体预防试剂——德国MB公司生产的Water Shield，可以很好地解决以上问题。

该试剂含有表面活性剂和季铵化合物，并且配合络合剂成分，有效抑制微生物生长的同时，还能保持水分。另外，水槽支原体预防试剂Water Shield本身不会导致水垢产生，兼容玻璃、陶瓷、塑料、橡胶、钢、贵金属和其他金属，不会腐蚀仪器。

不仅如此，水槽支原体预防试剂Water Shield本身也是一个“指示器”，在微生物严重污染、需要更换水的情况下溶液会从浅蓝色变为无色，保证消毒溶液的有效性。

产品成分不含醛或叠氮化物，不会挥发。因此，水槽支原体预防试剂Water Shield对于CO2培养箱中的细胞是安全的。

按照正确的使用说明操作处理后的液体，在长达4周内，不会受到细菌、真菌和支原体的污染。

使用起来也很方便快捷。水槽支原体预防试剂Water Shield是200倍浓缩液。CO2培养箱水槽大概是一般为1-2L水只需添加一瓶10ml即可。而且该试剂仅需室温储存，降低了对储存设备的要求。

二、严格把控试剂和培养基质量：除了做好实验室的清洁工作，选择高品质的实验试剂，也是实验成功对的重要保障。以细胞实验中常见的胎牛血清为例。

三、规范细胞培养操作：遵守无菌操作规范，使用一次性或经过严格消毒的器材进行细胞培养。减少在恒温水浴环境中的停留时间，避免交叉污染。

四、定期检测微生物污染风险：定期对实验室环境和恒温水浴系统进行微生物污染检测，包括支原体污染的检测。一旦发现污染问题，立即采取措施进行处理。

祛除细胞实验室中恒温水浴环境中的支原体污染是保障实验结果稳定性的重要环节。通过加强实验室环境管理、严格把控试剂和培养基质量、规范细胞培养操作以及定期检测微生物污染风险等措施，我们可以有效降低支原体污染的风险，为细胞培养和科学研究提供安全、可靠的环境保障。