Venor®Gem OneStep
品名 | 货号 | 规格 | 价格 |
常规PCR Kit (一步法) Venor®Gem OneStep | 11-8025 | 25次/盒 | 询价 |
11-8050 | 50次/盒 | 询价 | |
11-8100 | 100次/盒 | 询价 | |
11-8250 | 250次/盒 | 询价 |
支原体常规PCR法介绍
常规PCR法:是根据支原体核糖体16s-23s rRNA的特异保守序列设计引物,对待检样本DNA进行扩增,通过对扩增产物的大小分析作出诊断。
优点:①灵敏度高,特异性好。②时间短,2-3小时出结果。③符合欧洲药典。④操作简单。
缺点:①对于已做支原体灭活处理的样品,由于支原体DNA仍旧存在其中,PCR结果会出现假阳性。(可用培养法做补充验证)。②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大(由于引物及内在设计不同),需谨慎选择,尽量在专业人员推荐指导下使用。
『支原体常规PCR检测试剂盒』介绍
德国MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒,依据操作步骤的细微差别,分一步法和经典法两类。此两类试剂盒较全球其他厂家同类产品,具有以下独特的优点:
①高特异性,270bp左右的一条阳性对照条带,涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种,操作简单,结果易于观察。(使用MB的试剂盒,下表列出的支原体物种均为阳性,其他微生物或真核细胞均为阴性。根据16s rRNA序列的同源性比对,该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。)
②高灵敏度,1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。
③试剂盒含内控对照,可防止假阴性的发生。
④符合欧洲药典要求。
支原体PCR检测试剂盒(一步法)适用范围
科研用户,细胞上清的筛查可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒(一步法)。(详见下文)
【Venor® Gem OneStep (货号:11-8050)】或【Venor® Gem Advance (货号: 11-7096)】
B. 对于需遵循药典要求的生物制药企业,可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒(经典法)。
【Venor® Gem Classic(货号: 11-1050) 】+ Taq酶 (货号: 53-1050)】
或【Venor® Gem Classic (货号: 11-1050G)】
支原体PCR检测试剂盒(一步法)特点
1. 内控对照已加在预混液中,无需另外配置,使用便捷。
2.高特异性,仅一条阳性对照条带,即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。
操作简单,易于观察。
3.高灵敏度,1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。
4.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。
支原体PCR检测试剂盒(一步法)操作步骤
下列图示以Venor® Gem OneStep 支原体 常规PCR 检测试剂盒 (一步法)( 货号:11-8050) 为例,具体产品操作以说明书为准。
第1步:样本处理
第2步:试剂制备
第3步:PCR体系建立
第4步:启动PCR反应
第5步:电泳结果分析
191bp为内控对照条带,表明PCR反应正常。
当样本存在支原体污染时,由于内控对照与支原体DNA存在竞争,内控对照条带变弱(例如支原体DNA>103拷贝)。
阳性对照中支原体DNA>104拷贝,内控对照条带会完全消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带,此条带不影响检测结果。
如果待测样本对PCR产生抑制,则内控对照条带变弱(和阴性对照相比),此时应先进行DNA抽提(推荐使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒),然后再检测。
储存条件
2~8℃至少12个月。复溶后必须在-18℃保存。
效期
1年6个月