细胞有支原体污染影响做实验吗

2024-02-28
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细胞受到支原体污染会对实验结果产生影响。支原体污染可能导致细胞形态学的变化,如细胞大小和形状的不规则变化,细胞膜的破坏等。此外,支原体还会抑制细胞生长,导致染色体畸变,细胞膜抗原性改变,以及细胞复苏后存活率降低等。这些变化可能会影响实验结果的解释和数据的可靠性。下面四个研究揭示「支原体污染」对细胞实验的影响

影响细胞脂类代谢

研究人员以不同浓度的肺炎支原体处理人肺癌上皮细胞,不同时间后提取胞膜及表面的鞘脂类,应用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱一进行分析应用RT-PCR和免疫荧光方法,检测鞘脂类代谢通路中两个关键酶的变化。

实验结果:

肺炎支原体和细胞大多数鞘脂类组成成分相同;感染能影响细胞的鞘脂类代谢,包括诱导新种类的神经酞胺的生成,升高或降低某些神经酞胺的浓度,在一定浓度和时间点能诱导酸性鞘磷脂酶的聚簇和丝氨酸棕搁酞转移酶的变化。

对黑色素瘤细胞的影响

在研究早期传代黑色素瘤细胞系中的干细胞样特性时,研究人员注意到感染了猪鼻支原体的细胞系的实验组的可重复性差。

研究人员用支原体感染其他黑色素瘤细胞系.研究发现,支原体感染在培养中会产生多形性效应,从细胞凋亡到增强的致瘤性和侵袭性,并且会造成相当大的资源浪费和实验结果解释的混乱[2]

诱导细胞产生炎症因子

在一项研究中,研究人员利用肺炎支原体感染A549细胞。

研究发现发现,肺炎支原体能刺激A549细胞分泌TNF-α, 其产生水平与刺激时间具有量的正相关性;肺炎支原体还能刺激A549细胞分泌IL-8, 其产生水平与刺激时间亦具有量的正相关性。而被支原体感染的A549细胞分泌TNF-α和IL-8可能与NF-κB的激活有关。

诱导细胞氧化应激

在这项研究中,研究人员利用多巴胺能神经元细胞系(BE-M17),使用单细胞凝胶电泳(彗星试验),来评估支原体感染对基因组不稳定性和碱基切除修复(BER)活性的影响。

结果表明,与未感染的细胞相比,支原体感染在没有炎症反应的情况下诱导氧化应激,DNA损伤水平(链断裂/碱不稳定位点(SB/ALS)和氧化嘌呤)显著增加。未感染细胞修复SB/ALS的速度比感染细胞更快。未感染的细胞在24小时内就能修复氧化嘌呤,而感染的细胞在30小时后也不能修复。

总之,本研究表明,支原体感染不仅会诱导氧化应激和DNA损伤,而且还会降低负责氧化损伤DNA修复的主要途径,即BER的效率

[1]郁园园. 肺炎支原体感染干扰人肺癌上皮细胞A549的脂类代谢[D],2008.

[2]Ji Y, Karbaschi M, Cooke MS. Mycoplasma infection of cultured cells induces oxidative stress and attenuates cellular base excision repair activity. Mutat Res Genet Toxicol Environ Mutagen. 2019;845:403054. doi:10.1016/j.mrgentox.2019.05.010

[3]肺炎支原体诱导A549细胞分泌肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-8的相关性[J],2009,30(02):188-190+194.