细胞支原体消杀方法主要有以下几种:
使用支原体清除剂Zell Shield®,是一种即用型新型复合抗生素,副作用极低,能有效地祛除细胞培养支原体、细菌、真菌污染。Zell Shield®使用方法简单,直接加入培养基中保护细胞。
它的原理:通过抑制支原体增殖中某种蛋白的合成,达到抑制新的支原体增殖的目的。属复合型的新型抗生素。它广泛适用于细胞培养相关的科研和工业领域。
清洗纯化法:包括细胞营养驯化、优质细胞群的筛选、细胞清洗和反复离心洗涤。其原理是利用离心力、细胞、微生物质量和悬液的浮力差达到清除支原体的目的。由于支原体个体小且除发酵支原体外多为细胞外寄生,通过反复洗涤细胞和低速离心换液可以使其中潜在的支原体数量降低至极限。如结合敏感抗生素的抑杀作用,效果更佳。
药物辅助加温处理:先用药物处理细胞,然后将污染的组织培养物放在41℃下培养一段时间(通常4~5小时,最长不超过18小时)。这种方法可以杀死支原体,但会对细胞产生不良影响。
使用支原体特异性血清:例如,用5%的兔支原体免疫血清可以去除支原体污染,因为特异抗体可以抑制支原体生长。然而,这种方法较为麻烦,不如使用抗生素方便和经济。
需要注意的是,不同的细胞类型和实验室条件可能需要不同的消杀方法。在选择消杀方法时,应考虑到其对细胞的影响以及实验室的具体条件。此外,为了预防支原体的再次污染,实验室应严格遵守无菌操作规范,使用无支原体污染的试剂和培养基。