细胞支原体清除剂是细胞培养过程中常用产品,由于支原体污染影响细胞的状态,造势实验结果可信度降低、可重复性差等问题。那细胞支原体清除剂如何使用呢?
细胞支原体清除剂Zell Shield为-18℃避光保存。使用前,建议融化分装。避免反复冻融。Zell Shield按1:100直接加入到新鲜配制的培养基。例如:500ml培养基中添加5ml Zell Shield,混合后在2~8℃保存可至少4周。37℃进行培养时,最多7天需要更换新的含有Zell Shield的培养基,以获得良好的保护。
此外需要注意的是,细胞支原体去除剂Zell Shield在培养基过滤前或过滤后加均可。如果培养基尚未无菌过滤,可在加入Zellshield后再进行无菌过滤。
一般情况下,使用了Zell Shield,就不必再额外添加双抗了。
细胞支原体清除剂Zell Shield适合如下两种情况:
1)培养的细胞面临支原体的高污染风险,尤其是取自生物有机体的原代细胞。这时建议在培养基中加1%的Zell Shield。
2)发现细胞已被支原体污染,而不愿意丢弃(如已转染,已经体外刺激或已费力扩增的细胞),希望继续培养,这时可采用下面的“悬浮冲洗法”进行支原体的祛除。
对于非常珍贵的细胞或不易获得的生物样品(如细胞种子),发现有支原体污染,希望挽救。这时我们推荐使用MB公司的Mynox或Mynox Gold进行支原体的祛除。
细胞支原体清除剂Zell Shield使用方法:
(1)在每次使用Zell Shield®之前,细胞传代时,先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法”处理好细胞,再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞,能达到更好的祛除支原体的效果(“悬浮冲洗法”的详细步骤,见下文)。
(2)Zell Shield®常规为-18℃保存,建议使用前,先融化分装,仍旧-18℃避光保存,使用时按需融化配制。避免反复冻融。
(3)Zell Shield®按1:100浓度可直接加入培养基。例如:500ml培养基中添加5ml Zell Shield®,50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培养基使用。